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155537181555A色谱柱
色谱是一种星散分(fēn)析手段,星散是核心,因此担负星散作用(yòng)的色谱柱是色谱體(tǐ)系的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分(fēn)析速度快等。市售的用(yòng)于HPLC的各种微粒填料如多(duō)孔硅胶以及以硅胶為(wèi)基质的键合相、氧化铝、有(yǒu)机聚合物(wù)微球(包括离子交换树脂)、多(duō)孔碳等,其粒度一样平常為(wèi)3,5,7,10μm等,柱效理(lǐ)论值可(kě)达5~16万/米。对于一样平常的分(fēn)析只需5000塔板数的柱效;对于同系物(wù)分(fēn)析,只要500即可(kě);对于较难星散物(wù)质对则可(kě)采用(yòng)高达2万的柱子,因此一样平常10~30cm左右的柱長(cháng)能(néng)知足复杂混合物(wù)分(fēn)析的必要。
色谱柱可(kě)分(fēn)為(wèi)添补柱和开管柱两大类。多(duō)為(wèi)金属或玻璃制作。有(yǒu)直管形、盘管形、U形管等外形。液相色谱通常均采用(yòng)添补柱。
色谱柱的星散结果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。
柱效受柱内外因素影响,為(wèi)使色谱柱达到服从,除柱外死體(tǐ)积要小(xiǎo)外,还要有(yǒu)合理(lǐ)的柱结构(尽可(kě)能(néng)削减添补床以外的死體(tǐ)积)及装填技术。即使的装填技术,在柱中间部位和沿管壁部位的添补情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这是管壁效应。这种管壁區(qū)大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一样平常的液相色谱體(tǐ)系中,柱外效应对柱效的影响遠(yuǎn)宏大于管壁效应。
保存操作
1、假如流动相含有(yǒu)酸或无机盐,应当先用(yòng)去离子水(20倍柱體(tǐ)积)冲洗干净。然后用(yòng)用(yòng)乙腈或甲醇保存色谱柱。用(yòng)柱子的接头密封,并放在稳固的环境中存放。
2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落,避免造成色谱柱性能(néng)的降低。
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